Introdução
Gram-negativas são bactérias que - após serem submetidas à técnica de coloração de Gram - adquirem uma coloração que varia do rosa ao vermelho.
Parede celular bacteriana
A parede celular bacteriana pode ser definida como uma estrutura rígida que envolve a célula bacteriana, conferindo-lhe certa resistência e condicionando sua forma.
O elemento fundamental que constitui a parede celular bacteriana é o peptidoglicano (também conhecido como mucopeptídeo bacteriano ou mureína).
O peptidoglicano é um polímero que consiste em longas cadeias polissacarídicas lineares, unidas por ligações cruzadas entre resíduos de aminoácidos.
As cadeias de polissacarídeos são compostas pela repetição de um dissacarídeo, que por sua vez consiste em dois monossacarídeos: o N-acetilglucosamina (ou NAG) e ácido N-acetilmurâmico (ou NAM), ligados entre si por ligações glicosídicas β-1,6.
Os dissacarídeos são então ligados uns aos outros com ligações glicosídicas do tipo β-1,4.
Ligado a cada molécula de NAM, encontramos uma "cauda" de cinco aminoácidos (um pentapeptídeo) terminando com dois aminoácidos iguais, mais precisamente, com duas moléculas de D-Alanine.
São exatamente essas moléculas terminais de D-alanina que - seguindo a ação da enzima transpeptidase - permitem a formação de ligações cruzadas entre as cadeias paralelas do peptidoglicano.
Mais especificamente, a transpeptidase origina uma ligação peptídica entre o terceiro aminoácido de uma cadeia polissacarídica e o quarto aminoácido da cadeia polissacarídica paralela.
Funções da parede celular
A parede celular bacteriana desempenha um papel protetor muito importante para a célula bacteriana, mas não só, ela também é capaz de regular o transporte de substâncias dentro da própria célula.
Portanto, pode-se dizer que as principais funções da parede celular são:
- Previna a degradação das células bacterianas devido à pressão osmótica. Na verdade, muitas vezes, as bactérias vivem em ambientes hipotônicos, ou seja, em ambientes onde grandes quantidades de água estão presentes e que são "mais diluídas" do que o ambiente interno da célula bacteriana. Essa diferença de concentração faz com que a água passe do ambiente externo (menos concentrado) para o interior da célula bacteriana (mais concentrado) na tentativa de equalizar a concentração entre os dois ambientes. A entrada descontrolada de água faria com que a célula bacteriana inchasse até estourar (lise osmótica).
A função da parede celular é justamente resistir à pressão externa da água, evitando o inchaço e a lise bacteriana. - Proteja a membrana plasmática e o ambiente celular de moléculas ou substâncias prejudiciais às próprias bactérias.
- Regula a entrada de nutrientes na célula bacteriana.
Tudo o que foi descrito até agora é válido tanto para a parede celular dos Gram-negativos quanto para a parede celular dos Gram-positivos.
No entanto, como o objetivo deste artigo é fornecer informações sobre as características das bactérias Gram-negativas, apenas a parede celular destas será descrita a seguir e a das bactérias Gram-positivas não será considerada.
Parede celular gram-negativa
Na parede Gram-negativa, a ligação peptídica que se forma entre as cadeias polissacarídicas do peptidoglicano é direta.
A parede celular do Gram-negativo é muito fina e tem espessura de 10 nm, mas é bastante complexa, uma vez que o peptidoglicano é circundado por uma membrana externa ancorada a ele.
A membrana externa consiste em uma folha interna do tipo fosfolipídio e uma folha externa formada por lipopolissacarídeo (ou LPS).
A membrana externa e o peptidoglicano estão conectados um ao outro através de lipoproteínas. Uma vez que a presença de apenas lipoproteínas na membrana externa impediria a passagem de moléculas hidrofílicas, outros complexos de proteínas particulares também estão presentes na membrana. Porine. Porinas são canais que permitem a passagem de pequenas moléculas hidrofílicas.
Para o transporte de moléculas maiores, por outro lado, outras proteínas de transporte estão presentes, i transportadoras.
O espaço presente entre a membrana externa e o peptidoglicano é denominado periplasma e contém proteínas e enzimas com funções biológicas.
O lipopolissacarídeo é substituído por três partes distintas:
- Uma parte interna de lipídios chamada lipídio A que tem funções de endotoxina, portanto, desempenha um papel importante na patogenicidade de Gram-negativos;
- Uma porção central de polissacarídeo chamada essencial;
- Uma cadeia polissacarídica externa chamada antígeno O. Esse polissacarídeo é composto por açúcares simples de vários tipos, reunidos em blocos de três ou cinco unidades e repetidos várias vezes para formar moléculas com certas características antigênicas típicas de cada espécie bacteriana.
Coloração de Gram
A coloração de Gram é um processo idealizado e desenvolvido em 1884 pelo bacteriologista dinamarquês Hans Christian Gram.
A primeira etapa deste procedimento envolve a preparação de um esfregaço (ou seja, uma película fina do material a ser analisado) fixado por calor. Ou seja, uma amostra da bactéria a ser analisada é colocada em uma lâmina e - por meio do calor - os microrganismos são mortos e bloqueados na própria lâmina (fixação a quente). Depois de preparar o esfregaço, você pode prosseguir com a coloração propriamente dita.
A técnica de coloração de Gram tem quatro etapas principais.
Fase 1
O esfregaço fixado por calor deve ser revestido com o corante violeta de cristal (também conhecido como violeta de genciana) por três minutos.Ao fazer isso, todas as células bacterianas ficarão roxas.
Fase 2
Neste ponto, la Solução de Lugol (solução aquosa de iodo e iodeto de potássio, definido como mordente, pois é capaz de fixar a cor) e deixa-se agir por cerca de um minuto.
A solução de Lugol é polar e penetra na célula bacteriana onde encontra o cristal violeta com o qual forma um complexo hidrofóbico.
Fase 3
A lâmina é lavada com água sanitária (geralmente álcool ou acetona) por cerca de vinte segundos. Em seguida, é lavado com água para interromper a ação do agente clareador.
No final desta fase, as células da bactéria Gram-positiva terão retido a cor roxa.
As células Gram-negativas, por outro lado, ficarão descoloridas. Isso ocorre porque o álcool ataca a estrutura do lipopolissacarídeo da membrana externa dessas bactérias, facilitando a perda do corante previamente absorvido.
Fase 4
Um segundo corante é adicionado à lâmina (geralmente, fucsina ácida ou safranina) e deixe agir por alguns minutos.
No final desta fase, as células da bactéria Gram-negativa, anteriormente descoloridas, assumirão uma cor que varia do rosa ao vermelho.
Tipos de bactérias Gram-negativas
Como o grupo Gram-positivo, o grupo Gram-negativo também inclui numerosas espécies bacterianas.
A seguir, algumas das principais bactérias pertencentes a esse grupo serão brevemente ilustradas.
Escherichia coli
EU"E. coli é uma bactéria normalmente presente na flora bacteriana intestinal humana, mas em indivíduos imunossuprimidos pode dar origem a infecções oportunistas.
De fato, E. coli é responsável por infecções oportunistas que causam patologias como uretrocistite, prostatite, meningite neonatal, colite enterohemorrágica, diarreia aquosa ou diarreia do viajante ou sépsis.
Dependendo do tipo de infecção que E. coli desencadeadores, diferentes tipos de antibióticos podem ser usados. Os medicamentos mais comumente usados são carbapenêmicos, algumas penicilinas, monobactamas, aminoglicosídeos, cefalosporinas ou macrolídeos (como claritromicina ou azitromicina).
Bactérias pertencentes ao gênero Salmonella
Essas bactérias são responsáveis por infecções do trato gastrointestinal que podem causar doenças como gastroenterite, tifo (febre entérica) e diarreia.
Ciprofloxacina, amoxicilina ou ceftriaxona são geralmente usados para combater infecções causadas por essas bactérias.
Klebsiella pneumoniae
Lá K. pneumoniae é responsável por infecções do trato geniturinário que causam cistite, prostatite ou uretrocistite e infecções do trato respiratório que causam abscessos pulmonares ou pneumonia.
Para o tratamento de infecções com K. pneumoniae cefalosporinas, carbapenêmicos, fluoroquinolonas ou alguns tipos de penicilinas são usados.
Bactérias pertencentes ao gênero Shigella
Esses microrganismos são responsáveis pelo aparecimento de doenças como disenteria bacilar e gastroenterite aguda.
As fluoroquinolonas são geralmente usadas para tratar esse tipo de infecção.
Vibrações (ou Vibrio)
As vibrações são bacilos curvos, ou seja, bactérias caracterizadas por uma forma de "vírgula".
Dentre as vibrações patogênicas para o homem, lembramos:
- Vibrio cholerae, responsável pelo início da cólera. Geralmente, infecções causadas por V. cholerae eles são tratados com tetraciclinas ou fluoroquinolonas.
- Vibrio parahaemolyticus, responsável por gastroenterite, enterocolite, diarreia e síndrome do tipo disentérico.
Em caso de infecção com V. parahaemolyticus antibióticos como fluoroquinolonas ou tetraciclinas podem ser usados. Em alguns casos, a antibioticoterapia pode ser evitada e o tratamento sintomático pode ser iniciado.
Bactérias pertencentes ao gênero Yersinia
As bactérias do gênero Yersinia são bacilos, ou seja, são bactérias caracterizadas por uma forma cilíndrica.
Entre as Yersinia patogênicas para o homem, lembramos:
- Yersinia enterocolitica, responsável pelo "início de" infecções gastrointestinais que causam doenças como gastroenterite aguda ou adenite mesentérica. Y. enterocolitica geralmente são tratados com antibióticos como fluoroquinolonas, sulfonamidas ou aminoglicosídeos.
- Yersinia pestis, responsável pelo aparecimento da peste bubônica. Infecções causadas por Y. pestis eles podem ser tratados com aminoglicosídeos, cloranfenicol ou fluoroquinolonas.
Campylobacter jejuni
o C. jejuni é um bacilo em espiral responsável pelo aparecimento de enterite aguda e diarreia.
As infecções por ele causadas podem ser tratadas com macrolídeos (como, por exemplo, a eritromicina) ou com fluoroquinolonas.
Helicobacter pylori
H. pylori é um bacilo curvo responsável pelo aparecimento de doenças gastrointestinais, como gastrite crônica ativa e úlcera péptica.
Tratamento para a "erradicação de"Helicobacter pylori prevê o uso de três tipos diferentes de medicamentos:
- Bismuto coloidal, um citoprotetor usado para prevenir a adesão do Helicobacter pylori à mucosa gástrica;
- Omeprazol ou outro inibidor da bomba de prótons para reduzir a secreção de ácido do estômago;
- Amoxicilina e / ou claritromicina, tetraciclinas ou metronidazol (drogas antibióticas para matar células bacterianas).
Haemophilus influenzae
H. influenzae é uma bactéria Gram-negativa responsável por infecções do trato respiratório e do sistema nervoso que podem causar otite aguda, epiglotite, sinusite, bronquite, pneumonia ou meningite bacteriana aguda.
Antibióticos comumente usados para tratar infecções de H. influenzae são cefalosporinas, penicilinas ou sulfonamidas.
Legionella pneumophila
Lá L. pneumophila é uma bactéria Gram-negativa responsável pela legionelose, uma "infecção que afeta o" sistema respiratório.
A legionelose pode ser tratada com medicamentos como azitromicina, eritromicina, claritromicina, telitromicina ou fluoroquinolonas.
